BD MAX™
O que é Biologia Molecular,
e qual a diferença no meu exame?
O que é Biologia Molecular,
A biologia molecular é um campo de estudo voltado para compreender os mecanismos básicos da função celular e suas técnicas mais utilizadas baseiam-se nas análises do DNA e RNA, presentes nas células dos seres vivos. Nos últimos 20 anos ocorreram muitos avanços nessa área, que é considerada um grande marco no desenvolvimento de diagnósticos inovadores e que impactam a prática médica.
As metodologias moleculares revolucionaram o diagnóstico e atualmente fazem parte da rotina de processamento desse tipo de amostra.
Quais são as vantagens
de um diagnóstico molecular?
O diagnóstico molecular baseia-se na análise do material genético, como o DNA de bactérias ou RNA de certos vírus. Ele tem sido cada vez mais utilizado para superar as limitações de outros métodos. Como por exemplo, a microbiologia convencional, que depende do crescimento do microrganismo, o que pode levar dias ou semanas, pois cada organismo possui necessidades específicas de crescimento.
O diagnóstico por biologia molecular oferece rapidez na conduta clínica e terapêutica, pois não requer esse crescimento prévio de microrganismos. Os resultados podem ser obtidos em horas. Entre as técnicas moleculares, a PCR em tempo real é a mais utilizada atualmente, oferecendo maior sensibilidade na detecção de bactérias, vírus, fungos e microrganismos resistentes a antibióticos.
O que é PCR em tempo real?
A PCR em tempo real utiliza reagentes específicos (um deles fluorescente) e um termociclador, equipamento que é programado com ciclos de temperatura.
Primeiro, o material genético é isolado e purificado a partir da amostra. Em seguida, pequenas partes desse DNA ou RNA são amplificados, ou seja, múltiplicados em diversas cópias para aumentar a quantidade de material genético, em vários ciclos.
Ao final de 30 a 50 ciclos, são produzidas milhões de cópias de um segmento genético, possibilitando a detecção precisa de microrganismos diversos.
Figura 1: Etapas da PCR convencional.
Qual a diferença entre PCR convencional e em tempo real?
Na PCR convencional, é necessária uma etapa extra, para poder verificar os resultados, já que na PCR em tempo real, temos um componente fluorescente que é incorporado à reação. Com isso, conforme as cópias de DNA são geradas, a fluorescência aumenta, e é captada em tempo real pelo equipamento, tornando o processo mais rápido e eficaz.
É a tecnologia usada nos equipamentos BD MAX™, por exemplo.
Figura 2: Etapas da PCR em tempo real com probes de hidrólise (TaqMan®).
Referências
- Albert P. Senft and Ann Marie LeVine. Basic molecular biology. Paediatric Respiratory Reviews (2005) 6, 199–208.
- biologia-molecular.info/dna.html
- David J Speers. Clinical Applications of Molecular Biology for Infectious Diseases. Clin Biochem Rev Vol 27, 2006
- Petr Kralik and Matteo Ricchi: A Basic Guide to Real Time PCR in Microbial Diagnostics, 2017
- J. Tkadlec et al: Broad-range bacterial PCR in infectious diseases: 2019
- CDC – Basic Science Training
- Higuchi et al., Biotechnology, 1992
- Samuel Yanga and Richard Rothman: PCR-based diagnostics in acute-care settings